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第三节 革兰阳性杆菌（第3页）

除作分离培养外，细菌计数对本菌所致食物中毒有诊断价值，因暴露于空气中的食品均在一定程度上受本菌污染。

2．检验方法：

（1）涂片镜检：将采集的标本用无菌生理盐水制成菌悬液，直接涂片，革兰染色镜检。

（2）活菌计数：将采集的标本用无菌生理盐水稀释成lO^-1~10^-3。

1涂布法：取各稀释液O.lml分别接种于卵黄琼脂平板上，用L形玻棒涂布均匀，置35℃孵育12h，本菌在该平板上产生蜡样光泽，易于识别。

2倾注平板法：取各稀释液O.lml注入空的无菌平皿，将融化冷至45℃～50℃的营养琼蜡适量倾入并立即混匀，冷凝后置35℃培养24~48h，每个稀释度平行作两个平皿。

计数时选择菌落数在30~300个之间的平板计数。

一般认为蜡样芽孢杆菌>10^5个／g或>10^5个／ml时，即有发生食物中毒的可能。

（3）分离培养：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，普通营养琼脂平板上即可生长。

血平板上形成明显的β溶血环，菌落似毛玻璃状。

（4）鉴定：根据形态、染色、生化反应等作出初步鉴定，之后可作血清学和噬菌体分型。

（5）药敏：本菌对氯霉索、红霉素和庆大霉素敏感，对青霉素、磺胺类和呋喃类耐药。

奴卡菌属（Nocardia）

本菌属有9个菌种，引发人类奴卡菌病的主要为星形奴卡菌（N.asteroides）、巴西奴卡菌（N.brasiliensis）和鼻疽奴卡菌（N.farcini-ca）.我国以星形奴卡菌为主。

它们是一类机会致病菌，其感染常发生于白血病、恶性淋巴瘤、哮喘、支气管扩张、结核病、慢性阻塞性肺部疾病、血色素沉着症、溃疡性结肠炎、酒精中毒、肝硬化、皮质类固醇治疗、接受肾和心脏移植的病人。

本菌主要通过呼吸道引起原发性、化脓性肺部感染，可出现类似结核的症状，并可经血液播散，到达机体任何器官。

奴卡氏菌病的病人大约有13患转移性脑脓肿，病人有头痛、癫痫发作、病灶神经缺陷或其他神经异常，但是血液和脑脊液培养总不能证实本菌的存在。

有些患者痰培养奴卡菌阳性，但没有奴卡氏菌病的临床证据，星形奴卡菌可能是呼吸道的正常菌群，因此分离物存在的意义有赖于临床诊断。

巴西奴卡菌常引起皮下感染，经常累及的部位是足部和腿部，故称足分枝菌病（a），本病常发生在南美洲、拉丁美洲，墨西哥也有发生。

1．压片检查：将组织或渗出液等标本置于玻片上革兰染色镜检，可发现菊花状物，但末端不膨大，革兰阳性，抗酸弱阳性。

本菌在脑脊液、脓胸穿刺液及痰中不形成菊花状物。

2．培养：接种沙氏培养基、血平板均可生长，不同种类可产生不同的色素。

3．鉴定：培养24~48h出现小菌落，粗颗粒样，表面干燥，涂片染色为革兰阳性纤细分枝菌丝，具弱抗酸性，可初步确定。

星形奴卡菌45C可生长，与其他奴卡菌可鉴别。

4．药敏：首选青霉素，然后为红霉素、四环素、林可霉素和磺胺。

分枝杆菌属（terium）

本菌属归属于放线菌科。

已发现的分枝杆菌有100多种，广泛分布于土壤、水、人体和动物体内，主要引起肺部病变，尚可引起全身其他部位的病变，常见的有淋巴结炎、皮肤软组织和骨骼系统感染，对严重细胞免疫抑制者还可引起血源性播散。

临床将分枝杆菌分为结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、麻风杆菌及腐物寄生性分枝杆菌（无致病性）：

1．结核分枝杆菌：是人类分枝杆菌病最主要的病原体，因其胞壁含有大量脂质成分，抵抗力强、能耐低温、耐干燥，在干燥的痰中可存活6~8个月，含有结核分枝杆菌痰液的尘埃可保持8～lOd的传染性。

该菌对湿热敏感，60℃半小时、80℃以上5min以内可死亡在煮沸条件下可完全杀菌，所以对于痰液污染物可通过焚烧灭菌。

另外，结核分枝杆菌对紫外线抵抗力差，日光直射4h即可死亡。

虽然在70%~75%乙醇中数分钟即被杀死，但由于乙醇能使痰中的蛋白质凝固，因此不宜用于痰的消毒。

对人类致病的结核分枝杆菌包括人结核分枝杆菌、牛结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌，统称为“结核分枝杆菌复合群”

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